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柱式病毒DNA/RNA提取试剂盒说明书(兽用)
【试剂盒组成】本试剂盒组成如下:
| 试剂盒组分 | 装量(50 次) |
| 裂解液LB | 25mL |
| 洗涤液WB | 60mL |
| 洗脱液EB | 10mL |
| 离心柱(含2ml套管) | 50套 |
【储存条件】
试剂盒各组分应保存于15-25C,有效期12个月。
【预期用途】
适用于血清、血浆、拭子、病毒培养物、病料等组织样本中病毒RNA及DNA的提取、富集、纯化,其处理后产物可直接用于下游分子实验。
【样本要求】
1、适用样本类型:经分离的血清、血浆,体液,组织样本,拭子等样本。
2、样本采集:按照常规样本采集方法进行采集
3、样本保存和运送:
1)样本运送采用冰壶加冰或泡沫箱加冰密封进行运输。
2)经处理后的DNA\RNA样本可立即用于下游实验,或-20±5C保存(3个月)。应避免反复冻融。
【操作步骤】
1、取出包装盒中的各组分,室温放置,待其温度平衡至室温确保没有结晶物存在后,混匀备用。
2 、取 200μL 待检样本到1.5mL离心管中,加入400μL裂解液LB,盖上管盖,颠倒混匀,室温静置5分钟。
3、短暂高速离心,小心吸取上清(约500μL),注意不要吸到沉淀,转移至离心柱(套上套管)中,12000rpm离心30秒。
4、弃掉套管中的废液,重新把离心柱置于套管中,加入500μL洗涤液WB,12000rpm离心30秒。
5、重复上述步骤“4”一次。
6 、弃去套管内液体,12000rpm空柱离心2min,除去残留的洗涤液。
7、将离心柱转移到新1.5mL灭菌离心管,向离心柱内加入50μL洗脱液EB,室温静置1分钟后,12000rpm离心1分钟,离心管中液体即为所得核酸。提纯核酸如不立即使用,请置于-20+5C保存,避免反复冻融。
【注意事项】
1、病毒具有感染能力,操作前必须准备好防御措施,操作时严格按照操作步骤进行,废物必须放入含消毒液中,以免污染实验室和工作人员。
2、为避免其它核酸的污染而出现假阳性,必须使用不含DNA和RNA的离心管、吸管、枪头、试剂和手套,工作人员戴口罩操作。
3、试剂盒组分具有一定腐蚀性,操作时需要戴乳胶手套和眼镜,避免粘染皮肤、眼睛和衣物。若粘染皮肤、眼睛,要立即用大量清水进行冲洗,必要时寻求医疗咨询。
4、病毒RNA易降解,请选用RNase Free的枪头和离心管进行操作。