布鲁氏菌竞争ELISA抗体检测试剂盒

详细信息

布鲁氏菌 (Brucella) cELISA抗体检测试剂盒说明书

兽药名称
通用名称：布鲁氏菌（Brucella）cELISA抗体检测试剂盒
商品名称：无
英文名称：Brucella Antibody Competitive ELISA Test Kit
汉语拼音：Bulushijun cELISA Kangti Jianceshijihe

作用与用途
布鲁氏菌病（Brucellosis）是由布鲁氏菌引起的一种人畜共患传染病，其主要感染牛、羊、猪等动物，可通过消化道、皮肤黏膜以及垂直传播等多种方式引起动物感染。
布鲁氏菌（Brucella）cELISA抗体检测试剂盒是参照补体结合试验研制而成的，可检测牛、羊和猪的牛种布鲁氏菌、羊种布鲁氏菌和猪布鲁氏菌的特异性抗体，是一种灵敏度高、特异性好的检测方法，可用于检测血清和血浆样品中的布鲁氏菌抗体。

主要组分与含量

注意事项
1） 试剂盒贮藏条件为2~8℃，开启前应确认其批号及有效期。
2） 过期产品请勿使用，不同批号的试剂盒组分禁止混用，所有液体试剂倒出后不可二次使用。
3） 试剂盒使用前各组分试剂均需于恒温箱(25℃±3℃ )中放置至少60分钟，使用后放置2~8℃保存。
4） 应避免检测过程中污染试剂盒中的试剂。
5） 试验所用仪器（如：微量移液器、恒温培养箱、ELISA洗板机、酶标仪）需要在使用前进行功能检查，确保其可用性、准确性。
6） 所有试剂严禁接触皮肤和粘膜。检测结束后所用耗材需按国家规定进行无害化处理。
7） 移液器吸头必须一次一换。
8） 未使用的微孔板条可装入密封袋中2~8℃保存。
9） 试剂盒中各组分容器只针对该组分使用，不可二次利用。
10） 仅供兽医诊断使用。

用法与判定
1、试剂准备
1） 所有试剂恢复至25℃（±3℃）后使用。
2） 1倍洗涤液的配制
10倍洗涤液使用超纯水或ddH2O进行10倍稀释，稀释后的洗涤液在2~8℃可以稳定保存1周。如配制100mL 1倍洗涤液需10mL 10倍洗涤液加90mL超纯水或ddH2O。
注意：10倍洗涤液有结晶时，务必完全溶解后再使用。
2、样品准备
1） 尽量使用新鲜采集的血清或血浆样品。
2） 不能用于检测严重污染或严重溶血的样品。
3） 如果样品浑浊，需离心后取上清进行检测。
4） 检测样品可在2~8℃保存5天，长时间保存时需要转移至-20℃或更低温环境中。
3、样品稀释及阴、阳性对照血清稀释
采用5倍稀释。按照“微孔板加样位置示例图”在稀释板中加入120μL样品稀释液，各孔分别加入30μL血清样品。同样比例稀释阳性对照血清（PC）与阴性对照血清（NC），即：在稀释板A1、B1、C1、D1孔各加入120μL样品稀释液，A1、B1孔各加入30μL NC，C1、D1孔各加入30μL PC，充分混匀。
4、操作步骤
1) 将所有组分从试剂盒中取出，在恒温箱(25℃±3℃)中放置至少60分钟。
2) 按照“微孔板加样位置示例图”向抗原包被板指定孔中分别加入100μL稀释后的样品以及100μL稀释后阴性对照血清(NC)、阳性对照血清(PC)。
3) 盖上封板膜，在恒温箱(25℃±3℃)中孵育60分钟（±2分钟）。
4) 用ELISA洗板机或微量移液器洗板，弃去孔中液体，每孔加300μL 1倍洗涤液，洗涤3次。最后一次洗涤后将酶标板在吸水纸上轻轻拍干，严禁各步骤之间孔板出现干燥情况。
5) 每孔加入100μL 抗Brucella HRP标记抗体。
警告：倒出瓶的HRP标记物禁止再次使用。
6) 盖上封板膜，在恒温箱(25℃±3℃)中孵育30分钟（±1分钟）。
7) 重复步骤4）。
8) 每孔中加入100μL TMB底物液。
9) 盖上封板膜，在恒温箱(25℃±3℃)中孵育15分钟（±1分钟）。
10) 每孔中加入50μL终止液，终止酶促反应。
11) 使用450nm波长测量吸光度值（OD值）。
12) 结果判定与计算。

5、判定
1） 试验成立条件
阴性对照平均值＞0.8；
阳性对照PI平均值＞70%；
如果检测结果不在界定范围内则需要重新进行检测。
2） 计算方法

3） 样品PI值计算公式

4） 判定标准

规格参数

包装