口蹄疫 3ABC抗体竞争ELISA检测试剂盒

详细信息

口蹄疫3ABC抗体竞争ELISA检测试剂盒说明书

兽药名称
通用名称：口蹄疫3ABC抗体竞争ELISA检测试剂盒
商品名称：无
英文名称：Foot and Mouth Disease 3ABC Antibody Competitive ELISA Test Kit
汉语拼音：Koutiyibingdu 3ABC Kangti Jingzheng ELISA Jianceshijihe

作用与用途
　　口蹄疫（FMD）是一种主要发生在猪、牛、羊及其它偶蹄目动物上的烈性传染病。口蹄疫病毒有7种主要血清型：O型、A型、C型、SAT-Ⅰ、SAT-Ⅱ、SAT-Ⅲ以及亚洲I型。在我国，O型、A型最为常见。
　　在口蹄疫疫苗免疫地区，可以通过检测口蹄疫病毒非结构蛋白抗体来鉴别诊断疫苗免疫和野毒感染动物。与结构蛋白不同，不同血清型病毒非结构蛋白核酸序列高度保守，具有较高的同源性，因此，无论何种血清型病毒感染产生的非结构蛋白抗体都基本相同。国际兽医局（OIE）规定可以通过EITB、AGP和 ELISA方法检测非结构蛋白抗体。本试剂盒适用于口蹄疫免疫区和非免疫区域的猪、牛、羊口蹄疫病毒流行病学调查。
　　口蹄疫病毒3ABC抗体竞争ELISA检测试剂盒包被重组非结构蛋白，用于检测口蹄疫非结构蛋白抗体。本试剂盒可以检测任何血清型口蹄疫病毒感染产生的非结构蛋白抗体，适用于口蹄疫疫苗接种动物，也适用于非接种动物非结构蛋白抗体的检测。本试剂盒适用于猪、牛、羊等动物的血清检测。

主要组分与含量

注意事项
1）试剂盒贮藏条件为2~8℃，开启前应确认其批号及有效期。
2）过期产品请勿使用，不同批号的试剂盒组分禁止混用，所有液体试剂倒出后不可二次使用。
3）试剂盒使用前各组分试剂均需于恒温箱（25℃±3℃）中放置至少60分钟，使用后放置2~8℃保存。
4）应避免检测过程中污染试剂盒中的试剂。
5）试验所用仪器（如：微量移液器、恒温培养箱、ELISA洗板机、酶标仪）需要在使用前进行功能检查，确保其可用性、准确性。
6）所有试剂严禁接触皮肤和粘膜。检测结束后所用耗材需按国家规定进行无害化处理。
7）移液器吸头必须一次一换。
8）未使用的微孔板条可装入密封袋中2~8℃保存。
9）试剂盒中各组分容器只针对该组分使用，不可二次利用。
10）仅供兽医诊断使用。

用法与判定
1、试剂准备
1）所有试剂恢复至25℃（±3℃）后使用。
2）1倍洗涤液的配制
10倍洗涤液使用超纯水或ddH2O进行10倍稀释，稀释后的洗涤液在2~8℃可以稳定保存1周。如配制100mL 1倍洗涤液需10mL 10倍洗涤液加90mL超纯水或ddH2O。
注意：10倍洗涤液有结晶时，务必完全溶解后再使用。
2、样品准备
1）尽量使用新鲜采集的血清样品。
2）不能用于检测严重污染或严重溶血的样品。
3）如果样品浑浊，需离心后取上清进行检测。
4）检测样品可在2~8℃保存5天，长时间保存时需要转移至-20℃或更低温环境中。
3、样品稀释及阴、阳性对照血清稀释采用5倍稀释。按照“微孔板加样位置示例图”在稀释板中加入120μL样品稀释液，各孔加入30μL血清样品。同样比例稀释阳性对照血清（PC）与阴性对照血清（NC），即：在稀释板A1、B1、C1、D1孔各加入120μL样品稀释液，A1、B1孔各加入30μL NC，C1、D1孔各加入30μL PC，充分混匀。
4、操作步骤
1）将所有组分从试剂盒中取出，在恒温箱（25℃±3℃）中放置至少60分钟。
2）按照“微孔板加样位置示例图”向抗原包被板指定孔中分别加入100μL稀释后的样品以及100μL稀释后阴性对照血清（NC）、阳性对照血清（PC）。
3）盖上封板膜，在恒温箱（25℃±3℃）中孵育60分钟（±2分钟）。
4）用ELISA洗板机或微量移液器洗板，弃去孔中液体，每孔加300μL 1倍洗涤液，洗涤3次。最后一次洗涤后将酶标板在吸水纸上轻轻拍干，严禁各步骤之间孔板出现干燥情况。
5）每孔加入100μL 抗FMDV 3ABC HRP标记抗体。
警告：倒出瓶的HRP标记物禁止再次使用。
6）盖上封板膜，在恒温箱（25℃±3℃）中孵育60分钟（±2分钟）。
7）重复步骤4）。
8）每孔中加入100μL TMB底物液。
9）盖上封板膜，在恒温箱（25℃±3℃）中孵育15分钟（±1分钟）。
10）每孔中加入50μL终止液，终止酶促反应。
11）使用450nm波长测量吸光度值（OD值）。
12）结果判定与计算。

5、判定
1） 试验成立条件
阴性对照OD450nm平均值＞0.7；
PC OD450nm平均值/NC OD450nm平均值＜0.3；
如果检测结果不在界定范围内则需要重新进行检测。
2） 计算方法

3） 样品S/N值计算公式

4） 判定标准

检测结果可疑的样品，建议再次检测

规格参数

包装