猪繁殖与呼吸综合征病毒ELISA抗体检测试剂盒

详细信息

猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV）ELISA 抗体检测试剂盒说明书

兽药名称
通用名称：猪繁殖与呼吸综合征病毒（ PRRSV）ELISA抗体检测试剂盒
商品名称：无
英文名称：Porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV）Antibody ELISA Test kit
汉语拼音：Zhufanzhiyuhuxizonghezhengbingdu ELISA Kangti Jianceshijihe

作用与用途
　　猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是一种病毒性疾病，典型的临床症状为猪繁殖障碍和呼吸道症状。该疾病每年都会给生猪养殖业造成严重的经济损失。
　　免疫过猪繁殖与呼吸综合征疫苗或感染过野毒的猪只均会产生特异性抗体，猪繁殖与呼吸综合征病毒（ PRRSV）ELISA抗体检测试剂盒可以用于检测猪血清或血浆中的特异性PRRSV抗体。
　　本试剂盒采用间接ELISA方法，包被板包被PRRSV重组N蛋白抗原，可通过HRP标记抗体来检测该病毒的特异性抗体。本试剂盒适用于检测PRRSVⅠ型（欧洲型）和PRRSVⅡ型（美洲型）病毒产生的抗体。

主要组分与含量

注意事项
1）试剂盒贮藏条件为2~8℃，开启前应确认其批号及有效期。
2）过期产品请勿使用，不同批号的试剂盒组分禁止混用，所有液体试剂倒出后不可二次使用。
3）试剂盒使用前各组分试剂均需于恒温箱（25℃±3℃）中放置至少60分钟，使用后放置2~8℃保存。
4）应避免检测过程中污染试剂盒中的试剂。
5）试验所用仪器（如：微量移液器、恒温培养箱、ELISA洗板机、酶标仪）需要在使用前进行功能检查，确保其可用性、准确性。
6）所有试剂严禁接触皮肤和粘膜。检测结束后所用耗材需按国家规定进行无害化处理。
7）移液器吸头必须一次一换。
8）未使用的微孔板条可装入密封袋中2~8℃保存。
9）试剂盒中各组分容器只针对该组分使用，不可二次利用。
10）仅供兽医诊断使用。

用法与判定
1、试剂准备
1）所有试剂恢复至25 ℃（±3℃）后使用。
2）1倍洗涤液的配制
10倍洗涤液使用超纯水或ddH2O进行10倍稀释，稀释后的洗涤液在2~8℃可以稳定保存1周。如配制100mL 1倍洗涤液需10mL 10倍洗涤液加90mL超纯水或ddH2O。
注意：10倍洗涤液有结晶时，务必完全溶解后再使用。
2、样品准备
1）尽量使用新鲜采集的血清或血浆样品。
2）不能用于检测严重污染或严重溶血的样品。
3）如果样品浑浊，需离心后取上清进行检测。
4）检测样品可在2~8℃保存5天，长时间保存时需要转移至-20℃或更低温环境中。
3、样品稀释
对样品进行50倍稀释。按照“微孔板加样位置示例图”在稀释板中每孔加入245μL样品稀释液，各孔加入5μL样品，充分混匀。
禁止稀释阳性对照血清（PC）与阴性对照血清（NC）。
4、操作步骤
1）将所有组分从试剂盒中取出，在恒温箱（25℃±3℃）中放置至少60分钟。
2）按照“微孔板加样位置示例图”向抗原包被板指定孔中加入100μL提前在稀释板中稀释后的样品。
3）向指定孔中分别加入100μL未稀释的阴性对照血清（NC）和阳性对照血清（PC）。
4）盖上封板膜，在恒温箱（25℃±3℃）中孵育30分钟（±1分钟）。
5）用ELISA洗板机或微量移液器洗板，弃去孔中液体，每孔加300μL 1倍洗涤液，洗涤3次。最后一次洗涤后将酶标板在吸水纸上轻轻拍干，严禁各步骤之间孔板出现干燥情况。
6）每孔加入100μL PRRSV HRP标记抗体。
警告：倒出瓶的HRP标记物禁止再次使用。
7）盖上封板膜，在恒温箱（25℃±3℃）中孵育30分钟（±1分钟）。
8）重复步骤5）。
9）每孔中加入100μL TMB底物液。
10）盖上封板膜，在恒温箱（25℃±3℃）中孵育15分钟（±1分钟）。
11）每孔中加入50μL终止液，终止酶促反应。
12）使用450nm波长测量吸光度值（OD值）。
13）结果判定与计算。

5、判定
1）试验成立条件
阳性对照OD450nm平均值＞0.4；
阴性对照OD450nm平均值＜0.3；
如果检测结果不在界定范围内则需要重新进行检测。
2）计算方法

3）样品S/P值计算公式

4）判定标准

规格参数

包装